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實時熒光定量PCR技術(Real-timequantitativePolymeraseChainReaction簡稱RealTimePCR,如果用于RNA檢測,這被稱為逆轉錄實時PCR即Real-timeRT-PCR)是實時PCR法,它是指對DNA或經過反轉入(RT-PCR)的RNA通過聚合酶鏈式反應并實時監(jiān)測DNA的放大過程,在擴增的指數增長期就測量擴增產物,因為擴增指數增長期測量值與特異DNA(RNA)起始量存在相關性,從而實現定量檢測。RealTimePCR的基本目標是...
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1,多肽合成的研究歷史多肽合成研究已經走過了一百多年的光輝歷程,1902年,EmilFischer首先開始關注多肽合成,由于當時在多肽合成方面的知識太少,進展也相當緩慢,直到1932年,MaxBergmann等人開始使用芐氧羰基(Z)來保護α-氨基,多肽合成才開始有了一定的發(fā)展。到了20世紀50年代,有機化學家們合成了大量的生物活性多肽,包括催產素,胰島素等,同時在多肽合成方法以及氨基酸保護基上面也取得了不少成績,這為后來的固相合成方法的出現提供了實驗和理論基礎。1963年,...
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影響電泳分離的主要因素:1.待分離生物大分子的性質:待分離生物大分子所帶的電荷、分子大小和性質都會對電泳有明顯影響。一般來說,子帶的電荷量越大、直徑越小、形狀越接近球形,則其電泳遷移速度越快。2.緩沖液的性質:緩沖液的pH值會影響待分離生物大分子的解離程度,從而對其帶電性質產生影響,溶液pH值距離其等電點愈遠,其所帶凈電荷量就越大,電泳的速度也就越大,尤其對于蛋白質等兩性分子,緩沖液pH還會影響到其電泳方向,當緩沖液pH大于蛋白質分子的等電點,蛋白質分子帶負電荷,其電泳的方向...
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旋轉蒸發(fā)器主要用于在減壓條件下連續(xù)蒸餾大量易揮發(fā)性溶劑。尤其對萃取液的濃縮和色譜分離時的接收液的蒸餾,可以分離和純化反應產物。旋轉蒸發(fā)器的基本原理就是減壓蒸餾,也就是在減壓情況下,當溶劑蒸餾時,蒸餾燒瓶在連續(xù)轉動。結構:蒸餾燒瓶可是一個帶有標準磨口接口的梨形或圓底燒瓶,通過一高度回流蛇形冷凝管與減壓泵相連,回流冷凝管另一開口與帶有磨口的接收燒瓶相連,用于接收被蒸發(fā)的有機溶劑。在冷凝管與減壓泵之間有一三通活塞,當體系與大氣相通時,可以將蒸餾燒瓶,接液燒瓶取下,轉移溶劑,當體系與...
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1、氣泡溢出流動相內有氣泡,關閉泵,打開泄壓閥,打開purg鍵,清洗脫氣,氣泡不斷從過濾器冒出,進入流動相,無論打開purge鍵幾次,都無法清除不斷產生的氣泡。原因過濾器長期沉浸于乙酸銨等緩沖液內,過濾器內部由于霉菌的生長繁殖,形成菌團,阻塞了過濾器,緩沖液難以流暢地通過過濾器,空氣在泵的壓力作用下經過濾器進入流動相。處理過濾器浸泡于5%硝酸溶液中,超聲清洗幾分鐘即可;亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12~36小時,輕輕震蕩幾次,再將過濾器用純水清洗幾次,打開泄壓閥,打開pu...
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